Numéro de la revue: Volume 30 , Numéro 1
.مصارح م. ، طهراوي ك. ، بوزرنة ن ، بولعقود م. ص
كلية العلوم، جامعة باجي مختار – عنابة
ABSTRACT
يقوم أنزيم تحويل الأنجيوتنسين I أ و Peptidyl dipeptide hydrolase بدور هام في النظام رينين- أنجيوتنسين – ألدوستيرون، و ذلك بتحويل الأنجيوتنسين I إلى مركب فعال و هو الأنجيوتنسين I. الذي يمتلك فعالية كبيرة في تقلص الأوعية الدموية، كما يساهم في تشكل الأنجيوتنسينIII وهو هرمون يحث على إنتاج الألدوسترون بالإضافة إلى أدواره المتعددة الأخرى. ECAIهو جليكوبروتين يتكون من سلسلة ببتيدية واحدة. يضم عنصر الزنك في مركزه الفعال.
يهدف هذا البحث إلى تنقية أنزيم تحويل الأنجيوتنسين I من رئة الفأر Wistar بإستخدام تقنيات الكروماتوغرافيا من جهة ودراسـة خصائصة البيوكيميائية والأنزيمية من حهة أخرى. وذلك أنطلاقا من المستخلص الرئوي : الإستخلاص بإستعمال منظف غير أيوني Nonidet P-40 ثم تطبيق كروماتوغرافيا التبادل الأيوني على هلامة DEAE – Spherodex M ، كروماتوغرافيا الألفة على هلامة Sepharose وذلك بإستخدام مثبط نوعي للأنزيم Lisinopril MK-521) ) مثبت على الهلامة (MK-521/ Sepharose CL-4B) . حيث وصل النشاط الأنزيمي النوعي والمردودية U/mg 11.97 و 214.643 على الترتيب. كما تبين نتائج الهجرة الكهربائية على هلامة الأكريلاميد (PAGE- SDS) وجود شريط واحد مما يدل على نقاوة الأنزيم مع وجود بعض الشوائب. والتي تم التخلص منها بتطبيق تقنية كروماتوغرافيا السائل ذات الأداء العاليHPLCعلى هلامةSuperose 12 حيث أزداد النشاط الأنزيمي النوعي والمردودية وبكيفية معتبرة و بلغ U/mg 33.43 و 596.96 على الترتيب مع ظهور شريط واحد فقط على هلامة الهجرة الكهربائية. تم تقدير تأثير بعض المثبطات على نشاط الأنزيم حيث يمتلك Enalaprilate قدرة تثبيط تفوق بـ 4 مرات قدرة Lisinopril أما EDTAفيمتلك قدرة تثبيط ضعيفة بإعتباره مثبط غير نوعي مقارنة بالمثبطين السابقين. تم تعيين كذلك الوزن الجزيئي للأنزيم والذي بلغ 170000دالتون. بينت هذه الدراسة على إمكانية تنقية أنزيم تحويل الأنجيوتنسين I من رئة الفأر Wistar بإستخدام تقنيات الكروماتوغرافيا
الكلمات الدالة : أنزيم تحويل الأنجيوتنسين، التنقية، الكروماتوغرافيا مواصفات الأنزيم، ، PAGE-SDS
،